研究方向
1. 重组蛋白基本信息
- 蛋白名称:IL-1F10(Interleukin-1 Family Member 10),现命名 IL-38
- 基因ID:ENSG00000136634(NCBI Gene)
- UniProt编号:A6NIX2
- 分子量:约17 kDa(非糖基化形式)
- 表达系统:常用 大肠杆菌(E. coli)(包涵体需复性)或 哺乳动物细胞(如HEK293,保留天然修饰)
2. 生产与质量控制要点
(1)表达与纯化流程
-
载体构建:
- 选择带His标签(如pET-28a)或GST标签的载体,便于后续纯化。
- 哺乳动物系统需优化信号肽(如IL-2信号肽)促进分泌。
-
纯化步骤:
- Ni-NTA亲和层析(His标签)→ 分子筛层析(去除聚集体)→ 离子交换(提高纯度)。
- 若含内毒素,需通过 Detoxi-Gel柱 处理(科研级要求<0.1 EU/μg)。
(2)活性验证
-
功能检测:
- ELISA/SPR:验证与IL-36R的结合亲和力(KD值通常在nM级)。
- 细胞实验:抑制IL-36诱导的NF-κB报告基因活性(如HEK293-IL-36R细胞模型)。
3. 科研应用场景
(1)炎症与免疫研究
-
抗炎机制:
- 在巨噬细胞中抑制LPS诱导的IL-6、TNF-α释放(需与IL-1RA对照实验)。
- 动物模型(如DSS结肠炎小鼠)中验证其减轻组织损伤的效果。
-
自身免疫病:
- 潜在治疗银屑病(通过下调IL-17/IL-23轴)。
(2)肿瘤微环境调控
- 争议性发现:可能通过调节Treg功能影响肿瘤免疫逃逸(需结合PD-1/PD-L1通路研究)。
4. 挑战与未来方向
-
结构优化:
- 通过点突变(如K45A)提高受体结合特异性。
-
临床转化:
- 需解决体内半衰期短的问题(如PEG修饰或Fc融合蛋白开发)。
活性测试:
Measured by its binding ability in a functional ELISA, immobilized IL1F10 at 1 µg/ml (100 µl/well) can bind rHuIL-1 Rrp2/Fc Chimera with a linear range of 0.15-5 µg/ml.
Swiss Prot:
Q8WWZ1
种属:
Human
表达宿主:
E.Coli
表达区间:
Met1-Trp152
实际分子量:
17 kDa
标签:
No tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human IL-1F10 Protein is produced by E.Coli expression system. The target protein is expressed with sequence (Met1-Trp152) of Human Human IL-1F10 (Accession Q8WWZ1) fused with a No tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。

