研究方向
CPE(基因位于 4q32.3)是一种锌依赖性羧肽酶,属于金属羧肽酶家族。其主要功能是剪切肽链C末端的碱性氨基酸残基(如精氨酸、赖氨酸),在激素前体加工、神经肽成熟及肿瘤发生中发挥关键作用。CPE的缺陷与内分泌疾病、神经精神障碍及癌症转移密切相关。
1. 生物学功能与分子机制
(1)酶学特性与底物谱
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催化作用:
- 在分泌途径(如高尔基体、分泌囊泡)中剪切激素前体(如胰岛素原→胰岛素+CPE-Arg);
- 偏好碱性氨基酸(pH 5.0-6.0最适活性),受内源性抑制剂如PCI(ProSAAS衍生的CPE抑制剂)调控。
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非酶功能:
- 膜结合形式(CPE-ΔN)作为促转移受体,通过结合肿瘤微环境中的基质成分(如纤连蛋白)增强侵袭性。
(2)疾病关联
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代谢疾病:
- CPE 突变导致激素加工缺陷(如糖尿病、肥胖),fat/fat 小鼠模型显示高血糖和肥胖;
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神经退行性疾病:
- 阿尔茨海默病患者脑内CPE活性降低,与β-淀粉样蛋白(Aβ)异常积累相关;
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癌症转移:
- CPE-ΔN过表达促进肝癌肺转移(患者生存期缩短50%)。
2. 研究意义与临床转化
(1)诊断标志物
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血清CPE-ΔN:
- 肝癌患者水平升高(AUC=0.82),优于AFP(甲胎蛋白);
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脑脊液CPE活性:
- 帕金森病早期诊断潜力(灵敏度75%)。
(2)治疗靶点
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抑制剂开发:
- 小分子CPE抑制剂(如CPEi-1)阻断肿瘤转移(临床前阶段);
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基因治疗:
- AAV载体递送CPE 基因改善糖尿病模型胰岛素分泌。
3. 检测方法与技术
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活性检测:
- 荧光底物(如Dansyl-Ala-Arg)定量酶活性;
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定位分析:
- 免疫荧光(抗体克隆号:MAB-5294)区分分泌型与膜结合型CPE。
4. 挑战与展望
- 双功能调控:设计选择性靶向CPE-ΔN(促转移)而不影响酶活性的药物;
- 递送系统:开发脑靶向CPE激活剂(如纳米颗粒穿透血脑屏障);
- 多组学整合:联合CPE突变谱与激素代谢组预测疾病风险。
生物活性
Measured by its ability to cleave a peptide substrate, benzoyl-AR-OH. The product, Arg, is reacted with orthophthaldialdehyde (OPA) to form a fluorescent molecule. The specific activity is >12,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P16870
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Arg42-Ser453
实际分子量:
57
kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human CPE Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Arg42-Ser453) of Human Human CPE (Accession P16870) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。