研究方向
重组大鼠肿瘤坏死因子-α(Recombinant Rat TNF-α)是通过基因工程在大肠杆菌或哺乳动物细胞中表达的高纯度蛋白。其具有天然TNF-α的生物活性,适用于炎症、肿瘤免疫及凋亡机制研究。
1. 关键特性
(1)分子与活性参数
- 分子量:17 kDa(非糖基化单体,还原条件);
- 纯度:≥95%(SDS-PAGE验证);
- 比活性:通常≥1×107 units/mg(基于L929细胞毒性实验);
- 内毒素:<0.1 EU/μg(LAL法检测)。
(2)种属与结构
- 种属特异性:与大鼠TNFR1/2结合,与人/小鼠TNF-α交叉反应性<5%;
- 氨基酸序列:覆盖全长成熟肽段(Val77-Leu233,UniProt P16599)。
2. 应用场景
(1)体外研究
- 炎症模型:诱导巨噬细胞(如NR8383)分泌IL-6/IL-1β(推荐浓度10-100 ng/mL);
- 凋亡实验:激活Caspase-3通路(如肝星状细胞凋亡检测)。
(2)体内研究
-
疾病模型:
- 脓毒症(5-10 μg/kg腹腔注射);
- 关节炎(关节局部注射,50 μg/关节)。
3. 使用注意事项
- 溶解建议:用含0.1% BSA的PBS(pH 7.4)溶解,避免反复冻融;
- 储存条件:-80℃长期保存,稀释后4℃稳定1周;
- 安全操作:需在BSL-2环境下处理(潜在炎症风险)。
4. 相关产品推荐
- 对照蛋白:重组大鼠TNF-α突变体(D143N,无活性对照);
- 检测试剂盒:大鼠TNF-α ELISA(灵敏度≤5 pg/mL)。
生物活性
Measured in a cytotoxicity assay using L-929 mouse fibrosarcoma cells in the presence of metabolic inhibitor actinomycin D.The ED50 for this effect is typically 0.0125-0.05 pg/mL..
Swiss Prot:
P16599
种属:
Rat
表达宿主:
293F
表达区间:
Leu80-Leu235
实际分子量:
18kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<1.0EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Rat Rat TNF-alpha Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Leu80-Leu235) of Rat Rat TNF-alpha (Accession P16599) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。