研究方向
Cathepsin E(CTSE) 是由 CTSE 基因编码的 天冬氨酸蛋白酶,属于肽链内切酶家族,主要表达于免疫细胞(如树突细胞、巨噬细胞)和胃上皮细胞。其核心特征包括:
- 结构特征:含2个活性中心天冬氨酸残基(Asp32/Asp215),以二聚体形式存在(分子量约42 kDa);
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功能核心:
- 抗原提呈:剪切外源性抗原生成MHC-II表位;
- 炎症调控:通过TLR9-NF-κB通路激活免疫应答;
- 疾病关联:与胃癌、炎症性肠病(IBD)及自身免疫病(如类风湿关节炎)相关。
1. 生物学功能
(1)免疫应答调控
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抗原加工:
- 在晚期内体/溶酶体中剪切抗原(如卵白蛋白),效率比Cathepsin D高3倍;
- CTSE−/−小鼠显示CD4+ T细胞激活延迟(流感模型)。
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炎症平衡:
- 通过TLR9识别剪切后的CpG-DNA,增强IFN-α分泌;
- 抑制过度炎症(IL-1β成熟减少)。
(2)病理作用
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肿瘤微环境:
- 胃癌细胞分泌CTSE促进血管生成(MMP-9激活);
- 通过剪切E-cadherin增强肿瘤转移(EMT诱导)。
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黏膜屏障:
- 胃上皮CTSE缺陷导致幽门螺杆菌易感性增加;
- IBD患者结肠CTSE表达异常(与肠道菌群失调相关)。
2. 研究意义
(1)机制探索
- 剪切特异性:偏好疏水性氨基酸(如Phe/Leu)的羧基端;
- 细胞定位:高尔基体-内体分选信号(YXXΦ基序)调控功能。
(2)转化潜力
- 癌症诊断:血清CTSE水平区分早期胃癌(AUC=0.78);
- 免疫治疗:CTSE抑制剂(如SID26681509)缓解自身免疫性肝炎。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测胃液/血清CTSE(健康人<5 ng/mL,胃癌>20 ng/mL);
- 免疫组化:定位胃黏膜上皮细胞质表达(抗体克隆3C2)。
(2)活性分析
- 荧光底物:MCA-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(DNP)-D-Arg-NH₂(Ex328/Em393 nm);
- 功能实验:抗原提呈细胞与T细胞共培养(CFSE增殖检测)。
4. 临床应用
(1)诊断价值
- 胃癌筛查:联合胃蛋白酶原I/II提升早期检出率;
- IBD分型:结肠活检CTSE低表达提示克罗恩病亚型。
(2)治疗进展
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靶向药物:
- Aspartic protease抑制剂:靶向活性中心(如Pepstatin A衍生物);
- CTSE-siRNA:纳米载体递送抑制肿瘤转移(临床前)。
- 疫苗佐剂:CTSE剪切优化的肿瘤抗原肽(黑色素瘤试验)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 双重角色:抑炎与促癌作用需组织特异性调控;
- 检测标准化:胃液pH波动影响CTSE活性测量。
(2)未来方向
- 智能递送:pH敏感型CTSE抑制剂靶向肿瘤微环境;
- 多组学整合:结合CTSE剪切组与免疫组库预测治疗响应。
生物活性
Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate, Mca-PLGL-DpaAR-NH2. The specific activity is >1,500 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P14091
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Gln18-Pro396
实际分子量:
48 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Cathepsin E Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gln18-Pro396) of Human Human Cathepsin E (Accession P14091) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。