研究方向
TRAP(ACP5) 是由 ACP5 基因编码的 铁依赖性酸性磷酸酶,属于紫色酸性磷酸酶家族(PAP),主要表达于破骨细胞、巨噬细胞及某些肿瘤细胞。其核心特征包括:
- 结构特征:含双铁核活性中心,可抵抗酒石酸抑制,分子量约35 kDa(单体)或同源二聚体;
-
功能核心:
- 骨吸收:降解骨基质中的磷酸化蛋白(如骨桥蛋白);
- 免疫调节:通过调控ROS水平影响巨噬细胞极化;
- 疾病关联:与骨质疏松、肿瘤转移(如乳腺癌骨转移)及自身免疫病(如类风湿关节炎)相关。
1. 生物学功能
(1)骨代谢调控
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破骨细胞活化:
- 分泌TRAP至骨吸收陷窝,水解无机焦磷酸盐(促进羟基磷灰石溶解);
- ACP5 敲除小鼠显示骨密度增加30%(骨硬化表型)。
- 胶原降解:通过激活MMP-9间接降解Ⅰ型胶原。
(2)免疫与炎症
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巨噬细胞功能:
- M1型巨噬细胞高表达TRAP,通过ROS-NF-κB通路促炎;
- 剪切TREM2调控小胶质细胞活性(阿尔茨海默病模型)。
- 自身免疫损伤:滑膜液TRAP水平与关节破坏程度正相关。
(3)肿瘤微环境
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转移促进:
- 乳腺癌细胞分泌TRAP诱导破骨细胞前体活化(“恶性循环”);
- 通过去磷酸化STAT3增强肿瘤干细胞特性。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “TRAP-ROS-破骨细胞”轴 在骨稳态中的双向调控;
- 解析 TRAP非催化功能(如细胞外囊泡信号传递)。
(2)转化潜力
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骨病治疗:
- TRAP抑制剂(如氧化钒衍生物)进入临床前试验;
- 血清TRAP5b(破骨细胞特异性亚型)作为骨质疏松标志物。
3. 检测方法
(1)活性检测
- 比色法:对硝基苯磷酸盐(pNPP)底物,酒石酸抑制对照;
- ELISA:血清TRAP5b(健康成人2-4 U/L,绝经后女性升高2倍)。
(2)组织定位
- 免疫组化:破骨细胞多核区强阳性(抗TRAP抗体克隆9C5);
- 荧光底物:ELF97磷酸盐标记骨吸收活跃区。
4. 临床应用
(1)诊断价值
- 骨质疏松:TRAP5b联合CTX-Ⅰ提升骨吸收评估准确性;
- 肿瘤骨转移:TRAP+循环肿瘤细胞提示骨转移倾向。
(2)治疗进展
-
靶向干预:
- 小分子抑制剂:靶向铁核活性中心(如TRAP-i系列);
- 抗体药物:抗TRAP单抗阻断乳腺癌骨转移(临床前)。
- 生物材料:TRAP响应型骨水泥调控局部骨修复。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 组织特异性:全身抑制TRAP可能干扰免疫监视;
- 动态监测:需开发活体TRAP活性成像技术。
(2)未来方向
- 智能递送:pH敏感型TRAP抑制剂靶向破骨细胞;
- 多组学整合:结合TRAP剪切组与骨代谢组预测疾病风险。
生物活性
Measured by its ability to cleave a substrate, p-Nitrophenyl phosphate (pNPP). The specific activity is >65,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P13686
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Ala22-Pro320
实际分子量:
36- 40 kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human TartRate Resistant Acid Phosphatase Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala22-Pro320) of Human Human TartRate Resistant Acid Phosphatase (Accession P13686) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。

