研究方向
Lipocalin-2(NGAL) 是由 Lcn2 基因编码的 分泌型载脂蛋白,属于脂质运载蛋白家族,主要由中性粒细胞、巨噬细胞和上皮细胞分泌。其核心特征包括:
- 结构特征:含β-桶状结构域,可结合铁载体(如肠杆菌素),分子量约25 kDa;
-
功能核心:
- 铁代谢调控:通过捕获细菌铁载体限制病原体生长(先天免疫);
- 炎症与修复:参与急性肾损伤(AKI)、代谢性疾病及肿瘤微环境调控;
- 疾病关联:与败血症、慢性肾病(CKD)及肥胖相关胰岛素抵抗密切相关。
1. 生物学功能
(1)先天免疫与铁稳态
-
抗菌作用:
- 剥夺细菌铁源(如大肠杆菌肠杆菌素),抑制其增殖;
- 敲除鼠(Lcn2−/−)对革兰阴性菌易感性增加。
- 铁转运:介导铁-肠杆菌素复合物进入细胞(通过膜受体24p3R)。
(2)炎症与组织损伤
-
AKI标志物:
- 肾小管损伤后2小时内尿NGAL显著升高(>100 ng/mL);
- 通过激活MMP-9促进炎症细胞浸润。
-
代谢调控:
- 脂肪组织NGAL促进巨噬细胞M1极化(肥胖模型);
- 肝脏中抑制胰岛素信号(通过JNK通路)。
(3)肿瘤双重作用
- 促癌:支持乳腺癌细胞转移(通过EMT激活);
- 抑癌:在结肠癌中通过铁剥夺抑制肿瘤生长。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “NGAL-铁-炎症”轴 在代谢性疾病中的核心作用;
- 解析 NGAL-MMP-9复合物 在组织修复与纤维化中的动态平衡。
(2)转化潜力
- AKI诊断:NGAL作为早期生物标志物(优于肌酐);
- 靶向治疗:重组NGAL(如rLCN2)用于败血症辅助治疗。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测血清/尿NGAL(正常鼠血清<10 ng/mL,AKI时>200 ng/mL);
- Western Blot:区分游离NGAL(25 kDa)与MMP-9复合物(130 kDa)。
(2)功能分析
- 细菌抑制实验:共培养NGAL与大肠杆菌(铁限制性培养基);
- 基因编辑模型:Lcn2−/−鼠研究代谢表型(如高脂饮食诱导肥胖)。
4. 临床应用
(1)诊断潜力
- AKI预警:心脏术后2小时尿NGAL>150 ng/mL预测肾损伤;
- 代谢疾病:血清NGAL与肥胖患者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)正相关。
(2)治疗探索
-
重组蛋白:
- rLCN2治疗铁代谢紊乱(临床前阶段);
- NGAL中和抗体(如抗NGAL-mAb)缓解慢性炎症。
- 生物标志物:联合NGAL/KIM-1提升AKI诊断特异性。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 功能复杂性:组织特异性作用差异(如肾脏vs.脂肪);
- 动态监测:需开发活体成像技术追踪NGAL分布。
(2)未来方向
- 纳米载体:靶向递送NGAL调节局部铁代谢;
- 多组学整合:结合NGAL互作组与代谢组解析疾病机制。
生物活性
Measured by its ability to bind Iron(III) dihydroxybenzoic acid [Fe(DHBA)3]. The binding of Fe(DHBA)3 results in the quenching of Trp fluorescence in Lipocalin-2. >1.0 µM of Fe(DHBA) can be bound underthe described conditions.
Swiss Prot:
P11672
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
Gln21-Asn200
实际分子量:
26-27 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse Lipocalin-2 / NGAL Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gln21-Asn200) of Mouse Mouse Lipocalin-2 / NGAL (Accession P11672) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。