研究方向
Cathepsin B (Ctsb) 是由 Ctsb 基因编码的 溶酶体半胱氨酸蛋白酶,属于木瓜蛋白酶家族,广泛表达于溶酶体和分泌途径中。其核心特征包括:
- 结构特征:含前体肽(抑制活性)和成熟酶域,兼具内肽酶和外肽酶(羧肽酶)双重活性,最适pH 4.5-6.0;
-
功能核心:
- 蛋白降解与加工:参与抗原呈递、激素激活及ECM重塑;
- 炎症与凋亡调控:通过剪切Bid蛋白激活caspase通路;
- 疾病关联:与肿瘤转移、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)及炎症性疾病(如关节炎)密切相关。
1. 生物学功能
(1)蛋白水解与细胞稳态
- 溶酶体降解:分解内吞的蛋白质和受损细胞器(自噬-溶酶体途径);
- ECM重塑:切割胶原IV、层粘连蛋白促进细胞迁移(伤口愈合/肿瘤转移)。
(2)免疫与炎症调控
- 抗原呈递:生成MHC-II类分子结合的抗原肽段;
- 炎症小体激活:通过NLRP3-IL-1β轴加剧炎症反应(如痛风模型)。
(3)肿瘤微环境作用
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转移促进:
- 激活MMP前体(如pro-MMP-9)增强ECM降解;
- 诱导EMT(上皮-间质转化)和血管生成(VEGF释放)。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “Ctsb-自噬-凋亡”三角关系 在疾病中的动态平衡;
- 解析 Ctsb分泌机制(如外泌体包裹)在肿瘤转移中的作用。
(2)转化潜力
- 抗癌策略:Ctsb抑制剂(如CA-074)阻断转移灶形成;
- 神经保护:靶向Ctsb的siRNA减轻Aβ毒性(AD模型)。
3. 检测方法
(1)活性分析
- 荧光底物:Z-Arg-Arg-AMC检测酶活性(Ex380/Em460 nm);
- 活性位点标记:DCG-04探针共价结合Ctsb(不可逆抑制剂)。
(2)表达定位
- 免疫组化:区分溶酶体(点状)与分泌型(弥散)Ctsb;
- 基因编辑模型:Ctsb 敲除鼠研究组织特异性表型。
4. 临床应用
(1)诊断潜力
- 肿瘤侵袭性:组织Ctsb活性与乳腺癌淋巴结转移正相关;
- 神经疾病:脑脊液Ctsb水平预测AD进展速率。
(2)治疗进展
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靶向药物:
- VBY-036:Ctsb/组织蛋白酶L双抑制剂(II期临床试验);
- 纳米载体:pH敏感型Ctsb抑制剂靶向肿瘤微环境。
- 基因治疗:AAV介导的Ctsb shRNA治疗神经退行性疾病(临床前)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 组织特异性:全身抑制可能干扰溶酶体正常功能;
- 动态监测:需开发活体成像技术追踪Ctsb时空活性。
(2)未来方向
- 双靶点设计:Ctsb/MMP联合抑制剂抗转移;
- 多组学整合:结合Ctsb剪切谱与蛋白质组学解析疾病机制。
生物活性
Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate Z-LR-AMC. The specific activity is >2,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P10605
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
His18-Phe339
实际分子量:
43 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse Cathepsin B Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (His18-Phe339) of Mouse Mouse Cathepsin B (Accession P10605) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。