研究方向
声波刺猬蛋白 (SHH) 前体经历自蛋白水解和胆固醇转移酶活性,导致蛋白质裂解成两部分:ShhN 和 ShhC。然后新生成的 ShhN 在其 C 末端与胆固醇部分共价连接。
1. 分子特征与表达
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蛋白结构:
- 分泌型糖蛋白(45 kDa),经自剪切生成N端活性片段(Shh-N),通过胆固醇和棕榈酰化修饰锚定细胞膜或释放至胞外。
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受体系统:
- Patched1(Ptch1):抑制Smoothened(Smo)的基线活性;
- Smo:激活下游Gli转录因子(Gli1/2/3)。
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表达模式:
- 发育期:脊索、神经管底板(Floor Plate)、肢芽区(ZPA)及肠道隐窝的关键形态发生素。
- 成体:维持干细胞巢(如脑室下区、毛囊 bulge)及组织修复(肺、肝)。
2. 核心功能与机制
(1) 发育调控
- 神经发育:背-腹侧神经管模式化(高浓度诱导V3中间神经元,低浓度诱导运动神经元)。
- 肢体形成:ZPA分泌Shh建立前后轴梯度,调控Hox基因表达。
(2) 成体稳态与疾病
- 干细胞维持:通过Gli1激活Bmi1等基因,支持肠道和神经干细胞自我更新。
- 肿瘤发生:异常激活导致髓母细胞瘤(Ptch1突变)、基底细胞癌(Smo突变)等。
- 纤维化疾病:通过Gli2促进肺/肝纤维化(TGF-β协同作用)。
3. 研究工具与模型
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基因工程小鼠:
- Shh-/-:胚胎致死(E9.5,神经管和肢芽缺陷),条件性敲除(如Shhfl/fl×Cre组织特异性)用于研究成体功能。
- 报告模型:Gli1-LacZ或Ptch1-LacZ小鼠标记Shh通路活性区域。
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干预策略:
- 抑制剂:Smo拮抗剂(如Vismodegib)已用于临床治疗基底细胞癌。
- 激动剂:Purmorphamine在脊髓损伤模型中促进神经再生。
4. 检测方法与临床应用
- ISH/IHC:定位Shh表达于特定组织(如胚胎神经管或肿瘤微环境)。
- 报告基因检测:荧光素酶载体(如8xGli-BS-Luc)定量通路活性。
- 治疗监测:循环Shh水平与某些癌症预后相关(如胰腺癌)。
5. 与人类SHH的差异
- 同源性:蛋白序列高度保守(>95%),但调控元件(如增强子)存在种属差异。
- 转化挑战:人类SHH突变谱更复杂(如全前脑畸形相关突变需小鼠人源化模型验证)。
生物活性
Measured by its ability to induce alkaline phosphatase production by C3H10T1/2 mouse embryonic fibroblast cells. The ED50 for this effect is 0.6-3 µg/mL.
Swiss Prot:
Q62226
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
Cys25-Gly198
实际分子量:
24 kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse Shh Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Cys25-Gly198) of Mouse Mouse Shh (Accession Q62226) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。