研究方向
Cathepsin H (CTSH) 是由 CTSH 基因编码的 溶酶体半胱氨酸蛋白酶,属于木瓜蛋白酶家族,广泛表达于溶酶体和分泌途径中。其核心特征包括:
- 结构特征:含前体肽(抑制活性)和成熟酶域,兼具内肽酶(切割蛋白质内部肽键)和外肽酶(从N端水解氨基酸)双重活性;
-
功能核心:
- 蛋白水解调控:参与抗原呈递、激素激活及ECM重塑;
- 免疫调节:通过剪切趋化因子(如CCL2)调控炎症反应;
- 疾病关联:与肿瘤转移、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)及肺部疾病(如肺气肿)密切相关。
1. 生物学功能
(1)蛋白加工与降解
- 抗原呈递:剪切内吞抗原生成MHC-I表位(如病毒蛋白);
- 激素激活:参与胰岛素原、甲状腺球蛋白的成熟加工。
(2)组织稳态与病理重塑
- ECM降解:切割胶原IV、层粘连蛋白促进肿瘤侵袭;
- 肺泡功能:调控表面活性蛋白(SP-B)成熟,缺陷导致肺发育异常。
(3)神经与免疫调控
- 神经毒性:过度激活导致Aβ和α-突触核蛋白聚集(AD/帕金森病模型);
- 炎症微环境:剪切CCL2/MCP-1增强单核细胞募集。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “双酶活性” 在生理/病理蛋白处理中的特异性选择机制;
- 解析 CTSH前体自抑制 的结构基础及激活途径。
(2)转化潜力
- 肿瘤治疗:CTSH抑制剂(如E-64d)阻断转移灶形成;
- 神经保护:靶向CTSH的siRNA减轻Aβ毒性(动物实验)。
3. 检测方法
(1)活性分析
- 荧光底物:Z-R-AMC检测外肽酶活性(最适pH 6.0);
- Western Blot:区分前体(28 kDa)与成熟形式(22 kDa)。
(2)定位与表达
- 免疫荧光:溶酶体标志物(如LAMP1)共定位;
- 血清检测:ELISA定量sCTSH(肺癌患者水平升高)。
4. 临床应用
(1)诊断潜力
- 肿瘤转移:组织CTSH活性与乳腺癌淋巴结转移正相关;
- 神经疾病:脑脊液CTSH水平预测AD进展速率。
(2)治疗进展
-
靶向药物:
- ASC-09:CTSH/组织蛋白酶B双抑制剂(HIV进入抑制剂衍生);
- 纳米载体:pH敏感型CTSH抑制剂靶向肿瘤微环境。
- 基因治疗:AAV-CTSH挽救肺表面活性缺陷(新生儿模型)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 组织特异性:全身抑制可能干扰生理性蛋白加工;
- 动态监测:需开发活体成像技术追踪CTSH时空活性。
(2)未来方向
- 双靶点设计:CTSH/MMP联合抑制剂抗转移;
- 多组学整合:结合CTSH剪切谱与蛋白质组学解析疾病机制。
生物活性
Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate, Arg-7-amido-4- methylcoumarin (R-AMC). The specific activity is >750 pmol/min/μg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P09668
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Ala23-Val335
实际分子量:
38- 43 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>90% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Cathepsin H Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala23-Val335) of Human Human Cathepsin H (Accession P09668) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。