研究方向
Serpin F2/Alpha-2-Antiplasmin (α2AP) 是由 SERPINF2 基因编码的 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin),是纤溶系统的核心调控分子。其核心特征包括:
- 结构特征:含典型的Serpin反应中心环(RCL),通过自杀式机制不可逆抑制纤溶酶;
-
功能核心:
- 纤溶抑制:快速中和游离纤溶酶(速率常数10^7 M^-1s^-1),防止过度纤维蛋白溶解;
- 纤维蛋白稳定:通过FXIIIa共价交联至纤维蛋白,增强凝块稳定性;
- 疾病关联:与出血性疾病、血栓形成及肿瘤转移密切相关。
1. 生物学功能
(1)纤溶系统调控
- 纤溶酶抑制:α2AP通过RCL与纤溶酶活性中心结合,形成1:1复合物;
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双重抑制模式:
- 直接抑制游离纤溶酶(血浆半衰期<0.1秒);
- 竞争性阻断纤溶酶原与纤维蛋白结合。
(2)凝血-纤溶平衡
- 纤维蛋白交联:FXIIIa介导α2AP共价连接至纤维蛋白α链(增强凝块抗纤溶能力);
- 血栓稳定:α2AP缺陷导致早发性血栓溶解(动物模型)。
(3)非经典功能
- 肿瘤微环境:α2AP通过抑制纤溶酶限制ECM降解(抑制转移);
- 炎症调控:切割后释放血管抑制肽(抑制血管通透性)。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “纤维蛋白-α2AP”共价交联 在血栓稳定性中的核心作用;
- 解析 α2AP剪切变体(如缺乏C端片段)的病理功能。
(2)转化潜力
- 抗纤溶治疗:重组α2AP(如A2AP-001)治疗遗传性α2AP缺乏症;
- 溶栓辅助:α2AP抑制剂(如TXA衍生物)增强tPA疗效。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测血浆α2AP(正常范围70-100 μg/mL,肝病时降低);
- 功能活性:发色底物法(S-2251)评估纤溶酶抑制能力。
(2)分子分析
- 免疫印迹:区分完整型(70 kDa)与降解型α2AP;
- 基因测序:SERPINF2 突变筛查(如p.N45K与遗传性缺陷相关)。
4. 临床应用
(1)诊断与分型
- 出血风险评估:α2AP<30 μg/mL提示纤溶亢进(如肝衰竭);
- 血栓倾向:α2AP过度交联与静脉血栓复发相关。
(2)治疗进展
-
替代治疗:
- A2AP-001:重组α2AP(临床前阶段);
- FXIII浓缩物:增强α2AP纤维蛋白交联(用于先天性FXIII缺乏)。
- 抗纤溶药物:氨甲环酸(TXA)模拟α2AP作用(用于创伤出血)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 治疗矛盾:全身性α2AP抑制可能增加血栓风险;
- 检测标准化:需区分功能活性与抗原水平。
(2)未来方向
- 靶向递送:纳米载体局部调控α2AP(如手术出血部位);
- 多组学整合:结合α2AP变异与纤维蛋白组学预测血栓风险。
生物活性
Measured by its ability to inhibit trypsin cleavage of a fluorogenic peptide substrate, Mca- RPKPVE-Nval- WRK(Dnp)- NH2. The IC50 value is <2.0 nM, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P08697-1
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Met28-Lys491
实际分子量:
67 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Serpin F2/alpha 2- Antiplasmin Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Met28-Lys491) of Human Human Serpin F2/alpha 2- Antiplasmin (Accession P08697-1) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。