研究方向
Serpin A5(又称Protein C Inhibitor, PCI)是由 SERPINA5 基因编码的 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)家族成员,广泛分布于血浆、精液及泌尿生殖系统。
1. 生物学功能
(1)凝血与纤溶平衡
- 抗凝作用:抑制活化蛋白C(APC),间接调控凝血级联;
- 纤溶抑制:通过抑制尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)限制纤维蛋白溶解。
(2)生殖系统调控
- 精液功能:在精浆中高表达,抑制过度纤溶保护精子完整性;
- 受精过程:可能通过调节前列腺特异性抗原(KLK3)活性影响精子穿透卵膜。
(3)炎症与癌症关联
- 肿瘤微环境:在前列腺癌中,PCI通过uPA抑制限制肿瘤转移;
- 炎症调节:与中性粒细胞弹性蛋白酶相互作用,调控组织损伤修复。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 Serpin多功能性:同一分子在凝血、生殖及癌症中的差异化调控;
- 解析 结构-功能关系:RCL序列变异如何影响靶蛋白酶特异性(如APC vs. 凝血酶)。
(2)转化潜力
- 抗血栓策略:设计PCI变体选择性增强APC抑制(减少出血风险);
- 癌症治疗:靶向PCI-uPA轴抑制肿瘤转移(如前列腺癌模型)。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测血浆/精浆PCI浓度(正常血浆范围5-15 μg/mL);
- 活性测定:发色底物法(如S-2366)评估APC抑制活性。
(2)功能分析
- 蛋白酶复合物检测:非还原SDS-PAGE分析PCI-蛋白酶共价复合物;
- 基因测序:SERPINA5 突变筛查(如遗传性PCI缺乏症)。
4. 临床应用
(1)诊断与风险评估
- 血栓性疾病:PCI水平降低可能提示获得性抗凝缺陷;
- 前列腺癌预后:精浆PCI/uPA比值与转移风险负相关。
(2)治疗探索
- 抗凝辅助:重组PCI用于肝素诱导血小板减少症(HIT)的替代抗凝;
- 生殖医学:精浆PCI补充改善少弱精症患者的精子活力(临床前阶段)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 功能复杂性:PCI在凝血与生殖系统中的平衡需精准调控;
- 检测标准化:不同体液(血浆 vs. 精浆)中PCI活性的临床解读差异。
(2)未来方向
- 组织特异性干预:纳米载体靶向递送PCI至病变部位(如前列腺肿瘤);
- 多组学整合:结合基因组(SERPINA5 SNP)与蛋白质组数据预测个体化风险。
生物活性
Measured by its ability to inhibit Recombinant Human Coagulation Factor II/Thrombin cleavage of a fluorogenic peptide substrate Boc-VPR-AMC. The IC50 value is <2 nM, as measured underthe described conditions.
Swiss Prot:
P05154
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
His20-Pro406
实际分子量:
50-55 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Serpin A5 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (His20-Pro406) of Human Human Serpin A5 (Accession P05154) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。