研究方向    

Human Plasma Kallikrein（KLKB1）是由 KLKB1 基因编码的 丝氨酸蛋白酶，属于激肽释放酶-激肽系统（KKS）的核心成员，主要在肝脏合成并以无活性形式（前激肽释放酶，PK）存在于血浆中。其核心功能包括：

• 激肽生成：切割高分子量激肽原（HK）释放缓激肽（Bradykinin），介导血管舒张和炎症反应；
• 凝血与纤溶调控：通过激活凝血因子XII（FXII）和尿激酶原（pro-urokinase）参与内源性凝血及纤溶平衡；
• 补体激活：间接促进补体旁路途径活化，链接炎症与免疫应答。

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1. 生物学功能

（1）血管与炎症调控

• 缓激肽释放：通过B2受体介导血管通透性增加和疼痛感知（如遗传性血管性水肿HAE的病理基础）；
• 内皮激活：促进NO和前列环素释放，调节血压和微循环。

（2）凝血-纤溶网络

• 凝血启动：FXII激活后触发内源性凝血途径（接触激活途径）；
• 纤溶促进：激活尿激酶原转化为尿激酶（uPA），增强纤维蛋白溶解。

（3）疾病关联

• 血栓形成：KLKB1过度激活与血栓性疾病（如深静脉血栓）相关；
• 肿瘤微环境：通过uPA激活促进肿瘤侵袭和转移（如胰腺癌）。

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2. 研究意义

（1）理论突破

• 揭示 接触系统双刃剑效应：KLKB1既参与生理性止血，又驱动病理性血栓和炎症；
• 解析 激肽系统-补体交叉对话：KLKB1-HK复合物可激活补体C1q。

（2）转化潜力

• HAE治疗：靶向抑制KLKB1的单抗（如Lanadelumab）已获批临床；
• 抗血栓策略：开发KLKB1/FXII双靶点抑制剂（如CSL312）减少出血风险。

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3. 检测方法

（1）活性与蛋白水平

• 发色底物法：检测KLKB1酶活性（如S-2302底物）；
• ELISA：定量血浆PK/KLKB1浓度（正常PK范围15-45 μg/mL）。

（2）基因分析

• KLKB1 突变筛查：遗传性PK缺乏症（罕见，伴出血倾向）。

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4. 临床应用

（1）诊断与分型

• HAE诊断：KLKB1活性升高联合C1酯酶抑制剂（C1-INH）缺乏确诊；
• 血栓风险评估：KLKB1-FXII轴激活标志物（如FXIIa-KLKB1复合物）。

（2）治疗进展

• 靶向药物：
  • Lanadelumab（Takhzyro）：长效KLKB1单抗，预防HAE发作；
  • CSL312：抗FXIIa单抗，同步抑制KLKB1活性（II期试验中）。
• 基因治疗：AAV载体递送 KLKB1 抑制剂（如反义寡核苷酸）的临床前研究。

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5. 总结与展望

（1）挑战

• 靶点安全性：完全抑制KLKB1可能增加感染风险（补体功能受损）；
• 动态监测需求：KLKB1活性随炎症/凝血状态波动，需实时检测技术。

（2）未来方向

• 精准干预：基于KLKB1剪切谱（如HK vs. FXII偏好性）设计特异性抑制剂；
• 微流控芯片：开发床旁KLKB1活性快速检测设备（急诊应用）。

生物活性

Measured by its ability to cleave a flourogenic peptide substrate Pro-Phe-Arg-7- amido-4- methylcoumarin (PFR-AMC). The specific activity is >1,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.

Swiss Prot:

P03952

种属:

Human

表达宿主:

293F

表达区间:

Gly20-Ala638

实际分子量:

80kDa

标签:

C-His

纯度：

>90% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Human Human Plasma Kallikrein/KLKB1 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gly20-Ala638) of Human Human Plasma Kallikrein/KLKB1 (Accession P03952) fused with a C-His.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。