研究方向
Human Apo-H(又称β2-糖蛋白I,β2GPI)是由 APOH 基因编码的 多功能血浆糖蛋白,属于载脂蛋白家族但主要参与免疫调控。其核心功能包括:
- 脂质代谢辅助:与脂蛋白(如LDL、HDL)结合,调节脂质转运与代谢;
- 自身免疫靶点:作为抗磷脂抗体综合征(APS)的主要自身抗原,介导血栓形成;
- 凋亡细胞清除:通过结合阴离子磷脂(如心磷脂)促进巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬。
1. 生物学功能
(1)脂质与血栓调控
- 抗凝血作用:正常状态下,Apo-H通过抑制凝血酶原酶复合物(FXa-Va)发挥天然抗凝功能;
- 促血栓转化:当与抗β2GPI抗体结合后,触发内皮细胞和血小板活化(APS病理核心)。
(2)免疫稳态
- 凋亡细胞清理:识别暴露的磷脂酰丝氨酸(PS),促进凋亡细胞清除(防止自身免疫反应);
- 补体调控:通过结合C3b/C4b抑制补体过度激活(保护组织免受炎症损伤)。
(3)感染防御
- 病原体中和:直接结合革兰阴性菌LPS和病毒包膜(如HCV),阻断其入侵宿主细胞。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 磷脂依赖性自身免疫 机制:抗β2GPI抗体通过破坏Apo-H的天然抗凝功能导致血栓;
- 解析 Apo-H结构-功能关系:其第五结构域(DV)是抗磷脂抗体的主要结合位点。
(2)转化潜力
- APS治疗靶点:开发DV结构域抑制剂(如肽类似物)阻断病理性抗体结合;
- 抗感染策略:基于Apo-H-LPS相互作用的广谱抗内毒素药物设计。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:定量血清Apo-H(正常范围150-300 μg/mL)及抗β2GPI抗体(APS诊断关键);
-
功能分析:
- 凝血实验:评估Apo-H对APTT(活化部分凝血活酶时间)的延长效应;
- 表面等离子共振(SPR):实时监测Apo-H与磷脂/抗体的结合动力学。
(2)基因检测
- APOH 突变筛查:罕见遗传性Apo-H缺乏症(伴出血倾向)。
4. 临床应用
(1)诊断与分型
- 抗磷脂抗体综合征:抗β2GPI抗体阳性联合血栓/流产病史确诊;
- 反复流产评估:Apo-H水平异常与妊娠并发症(如子痫前期)相关。
(2)治疗进展
-
靶向治疗:
- 重组Apo-H:用于遗传性缺乏症的替代治疗(临床前阶段);
- 单克隆抗体:阻断Apo-H-抗体复合物形成(如抗DV抗体)。
- 抗凝策略优化:APS患者需联合抗凝(华法林)与免疫抑制(羟氯喹)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 功能双相性:Apo-H在生理(抗凝)与病理(促血栓)中的角色转换机制仍需明确;
- 检测标准化:抗β2GPI抗体检测方法间差异影响APS诊断一致性。
(2)未来方向
- 结构改造药物:设计保留抗凝功能但规避抗体结合的Apo-H变体;
- 微流控技术:开发床旁快速检测Apo-H-抗体复合物的便携设备。
生物活性
Measured by its binding ability in a functional ELISA. When recombinant human ApoH is immobilized at 2 μg/mL, 100 µL/well, the concentration of recombinant human LDL R that produces 50% of the optimal binding response is found to be approximately 0.2 ‑ 0.8 μg/mL
Swiss Prot:
P02749
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Gly20-Cys345
实际分子量:
45-55 kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Apo-H Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gly20-Cys345) of Human Human Apo-H (Accession P02749) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。