研究方向
Human APOA1 是由 APOA1 基因编码的 高密度脂蛋白(HDL)主要结构蛋白,主要在肝脏和小肠合成。其核心功能包括:
- 胆固醇逆向转运:介导外周组织胆固醇运回肝脏代谢(抗动脉粥样硬化关键机制);
- HDL组装:作为HDL骨架,结合磷脂和载脂蛋白(如APOA2)形成功能性颗粒;
- 抗炎与抗氧化:抑制内皮炎症反应,保护低密度脂蛋白(LDL)免受氧化修饰。
1. 生物学功能
(1)脂质代谢调控
- 胆固醇外流:通过ABCA1/G1受体促进巨噬细胞胆固醇排出,形成新生HDL;
- LCAT激活:作为卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)辅因子,催化HDL胆固醇酯化。
(2)血管保护
- 内皮功能改善:上调一氧化氮(NO)合成,抑制VCAM-1表达(减少单核细胞黏附);
- 斑块稳定:减少动脉粥样硬化斑块内脂质堆积和炎症细胞浸润。
(3)其他功能
- 先天免疫:直接结合革兰阴性菌脂多糖(LPS),中和其毒性;
- 神经保护:阿尔茨海默病患者脑脊液中APOA1水平降低,可能与β-淀粉样蛋白清除相关。
2. 研究意义
(1)理论价值
- 揭示 HDL功能异质性:APOA1突变体(如APOA1-Milano)显示更强的抗动脉粥样硬化能力;
- 解析 胆固醇代谢网络:APOA1与SR-B1、CETP等分子的相互作用机制。
(2)转化潜力
- 心血管治疗:重组APOA1(如MDCO-216)用于急性冠脉综合征的临床试验;
- 生物标志物:APOA1/APOB比值预测冠心病风险优于传统血脂指标。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- 免疫比浊法:自动化定量血清APOA1(常规血脂检测项目);
- 质谱技术:区分APOA1异构体(如糖基化修饰影响功能)。
(2)功能分析
- 胆固醇外流实验:巨噬细胞(如THP-1)与荧光标记胆固醇共培养,定量APOA1介导的外流效率;
- HDL亚类分离:超速离心联合电泳分析APOA1在不同密度HDL中的分布。
4. 临床应用
(1)诊断与风险评估
- 低HDL血症:血清APOA1<120 mg/dL提示心血管高风险;
- 家族性APOA1缺乏症:罕见遗传病,表现为早发动脉粥样硬化。
(2)治疗进展
- APOA1模拟肽:如L-4F(口服制剂)在动脉粥样硬化模型中显示抗炎效果;
- 基因治疗:AAV载体递送 APOA1 基因的临床前研究(非人灵长类动物验证)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 功能复杂性:APOA1在HDL亚类中的角色差异(如小而密HDL vs. 大而轻HDL);
- 药物递送:重组APOA1半衰期短,需优化制剂(如PEG化修饰)。
(2)未来方向
- 精准医学:基于APOA1基因多态性(如rs670)的个性化干预;
- 多功能融合蛋白:设计兼具APOA1胆固醇外流和抗炎活性的工程化蛋白。
生物活性
When Recombinant Human Apolipoprotein A‑I/ApoA1 is immobilized at 5 µg/mL (100 µL/well), the concentration of Recombinant Human SR‑AI/MSR that produces 50% of the optimal binding response is approximately 0.5‑2.5 µg/mL.
Swiss Prot:
P02647
种属:
Human
表达宿主:
E.coli
表达区间:
Asp25-Gln267
实际分子量:
28 kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human APOA1 Protein is produced by E.coli expression system. The target protein is expressed with sequence (Asp25-Gln267) of Human Human APOA1 (Accession P02647) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。