活性重组蛋白 Recombinant Creatine Kinase MM (CK-MM) CKM / CKMM / EC 2.7.3 / EC 2.7.3.2 / M-CK Protein

研究方向    

Creatine Kinase MM (CK-MM) 是由 CKM 基因编码的 肌型同工酶，是磷酸肌酸-肌酸能量缓冲系统的核心组分，主要分布于骨骼肌和心肌中。其核心特征包括：

• 结构特征：由两个M亚基组成的二聚体（MM型），催化肌酸与ATP/磷酸肌酸的可逆转化；
• 功能核心：
  • 能量代谢：快速再生ATP，维持肌肉收缩的高能需求；
  • 损伤标志物：肌细胞损伤时大量释放入血，是横纹肌溶解和心肌梗死的关键诊断指标。

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1. 生物学功能

（1）能量稳态调控

• ATP缓冲系统：在肌肉高强度收缩时，CK-MM将磷酸肌酸转化为ATP（速率可达ATP合成酶的10倍）；
• 能量穿梭假说：线粒体与肌原纤维间通过CK-MM耦联能量传递（磷酸肌酸作为“能量载体”）。

（2）肌肉功能与保护

• 收缩调控：CK-MM与肌球蛋白结合，局部提供ATP优化收缩效率；
• 抗氧化作用：通过维持ATP水平减少缺血-再灌注损伤中的活性氧（ROS）积累。

（3）疾病关联

• 遗传性肌病：CKM 突变导致肌酸激酶缺乏症（如LGMD2G）；
• 获得性损伤：剧烈运动、创伤或他汀类药物诱发CK-MM释放（血清水平激增）。

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2. 研究意义

（1）理论突破

• 揭示 “磷酸肌酸能量穿梭” 在肌肉代谢中的时空动态；
• 解析 CK-MM结构-功能关系：如活性中心关键氨基酸（Cys283）的氧化修饰影响。

（2）转化潜力

• 运动医学：CK-MM活性作为运动员训练负荷的量化指标；
• 基因治疗：AAV载体递送 CKM 治疗遗传性肌病（动物模型验证）。

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3. 检测方法

（1）酶活性检测

• 比色法：基于NADPH生成速率（340 nm吸光度变化），参考范围38-174 U/L（男性略高）；
• 电泳/免疫抑制法：区分CK-MM（肌型）、CK-MB（心肌型）和CK-BB（脑型）。

（2）基因与分子分析

• 突变筛查：CKM 全外显子测序诊断遗传性肌病；
• 质谱检测：氧化修饰位点（如Cys283）与肌肉衰老的相关性分析。

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4. 临床应用

（1）诊断与监测

• 急性肌损伤：血清CK-MM>5倍上限提示横纹肌溶解（如他汀相关肌病）；
• 心肌梗死鉴别：CK-MM/CK-MB比值>5:1排除心梗（需结合肌钙蛋白）。

（2）治疗进展

• 运动医学干预：
  • 补充肌酸提升CK-MM缓冲能力（运动员常用）；
  • 抗氧化剂（如NAC）减少CK-MM氧化失活。
• 药物安全性监测：他汀治疗期间定期检测CK-MM预防肌病。

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5. 总结与展望

（1）挑战

• 特异性不足：CK-MM升高需结合病史区分生理性（运动）与病理性（肌病）原因；
• 动态监测技术：实时检测肌肉内CK-MM活性的方法尚未成熟。

（2）未来方向

• 纳米传感器：可穿戴设备动态监测CK-MM波动；
• 多组学整合：结合CK-MM与代谢组学（如乳酸/丙酮酸比值）评估肌肉功能。

生物活性

Measured by its ability to phosphorylate creatine. The specific activity is >1,900 pmol/min/μg, as measured under the described conditions.

Swiss Prot:

P06732

种属:

Human

表达宿主:

E.coli

表达区间:

Pro2-Lys381

实际分子量:

43kDa

标签:

N-His

纯度：

>95% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜1.0EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Human Human Creatine Kinase MM/CKMM Protein is produced by E.coli expression system. The target protein is expressed with sequence (Pro2-Lys381) of Human Human Creatine Kinase MM/CKMM (Accession P06732) fused with a N-His.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。